Esta prueba debe ser realizada preferentemente de 2 a 6 días después del nacimiento. Es sumamente importante que el recién nacido ya haya iniciado su ingesta de leche, por lo menos 48 a 72 horas antes de la toma de la muestra. Es indispensable que el recién nacido haya tomado leche, 2 a 3 horas antes de que se le tomen las muestras. Favor de tomar en cuenta que si el bebe ingiere medicamentos como ácido valproico, risperidona, cefalosporinas, dimecotina, benzodiacepinas, diuréticos, de asa y metoclopramida, es posible obtener resultados falsos positivos.